• ER-Tracker Red內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針
• 型號：FS1342
• 報價：976
• 地區(qū)：上海市
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• ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性，對活細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有高度選擇性的探針，不像傳統(tǒng)的DiOC6(3)，該系列探針幾乎不對線粒體著色，且在較低濃度即可實現(xiàn)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的染色，且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優(yōu)化步驟對活細胞染色后用醛固定，可以部分保留活細胞的染色特征。本品為，ER-Tracker Red內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針（活細胞成像用），其Ex= 587 nm，Em= 615。
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ER-Tracker Red內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針（活細胞成像用）產(chǎn)品簡介

ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性，對活細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有高度選擇性的探針，不像傳統(tǒng)的DiOC6(3)，該系列探針幾乎不對線粒體著色，且在較低濃度即可實現(xiàn)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的染色，且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優(yōu)化步驟對活細胞染色后用醛固定，可以部分保留活細胞的染色特征。

本品為，由紅色熒光染料BODIPY® TR和 Glibenclamide 偶聯(lián)而成，其Ex= 587 nm，Em= 615 nm。格列ben脲（Glibenclamide, glyburide），一種常用降血糖藥物，在胰島β細胞、胰島素的分泌、心肌衰竭細胞功能以及心律不齊的研究等方面具有重要科研用途。格列ben脲高度結(jié)合ATP-敏感型K+通道的磺脲受體，且本受體富集存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，因此適合用作內(nèi)質(zhì)網(wǎng)熒光探針。

本品為溶于DMSO的1 mM 濃度ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)儲存液，推薦工作濃度為～1 μM。我司還提供了ER-Tracker Red 稀釋液，使ER-Tracker Red的使用更加便捷。按照1:1000的比例稀釋，每10µl可以配制10ml ER-Tracker Red工作液；按照1:3000的比例稀釋，每10µl可以配制30ml ER-Tracker Red工作液。

產(chǎn)品組成

基本特性

分子式（Formula）：C44H42BClF2N6O7S2

分子量（Molecular Weight）：915.23

Ex/Em：587/615 nm 

                圖1.ER-Tracker Red內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針（活細胞成像用）激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。

濾片（Filter）：TRITC

外觀（Appearance）：液體

結(jié)構(gòu)式：

圖1.ER-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。

溶解性：溶于DMSO（1mM）

運輸儲存條件：冰袋運輸。≤-20℃避光干燥保存，至少六個月有效。避免反復(fù)凍融。

ER-Tracker Red內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針（活細胞成像用）使用方法（以下步驟僅做參考，具體請根據(jù)實際情況或參考文獻資料來調(diào)整。）

使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優(yōu)化。

1、ER-Tracker Red工作液的配制：
(1).取少量ER-Tracker Red按照1:1000的比例加入到ER-Tracker Red 稀釋液中。例如取1μl ER-Tracker Red加入到1ml ER-Tracker Red 稀釋液中。混勻后即為ER-Tracker Red工作液。
(2).ER-Tracker Red工作液使用前需37℃預(yù)溫育。
[注]：工作液中ER-Tracker Red的濃度可以根據(jù)實際情況進行適當調(diào)整，推薦的稀釋比例調(diào)整范圍為1:1000-1:3000。為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內(nèi)，建議盡量使用較低濃度的ER-Tracker Red。

2、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光標記：
(1).去除細胞培養(yǎng)液，用適量的溶液如HBSS with Ca2+ & Mg2+ (Hanks' Balanced Salt Solution with Ca2+ & Mg2+)（CAT#FS0395）洗滌生長在蓋玻片上的細胞。

(2).去除洗滌液，加入步驟1配制好的并37℃預(yù)溫育的ER-Tracker Red染色工作液，與細胞37℃共孵育15-30分鐘。
(3).去除ER-Tracker Red染色工作液，用細胞培養(yǎng)液洗滌細胞1-2次。
(4).隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進行觀察。此時可觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈明亮的強熒光染色。
(5).如果經(jīng)ER-Tracker Red染色后的細胞需要進行固定，可以使用4%甲醛37℃固定2分鐘。固定后用適當?shù)南礈煲合礈?/span>2-3次，每次5分鐘，隨后可以進行復(fù)染或滴加適當?shù)目篃晒獯銣绶馄海詈蠓馄^察。

[注]：ER-Tracker Red染色的細胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透處理會導(dǎo)致ER-Tracker Red的熒光染色消失。

注意事項

（1）熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

（2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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常見問題及解答FAQ

Q: 請問HBSS 里面的鈣鎂離子在里面起到什么作用？

A: 有利于維持細胞狀態(tài)，利于后續(xù)的染色。

Q: 請問固定后的死細胞還能染上嗎？

A: 該探針主要染的是活細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，固定樣本基本染不上色。

Q: 染色之后可以加抗熒光淬滅劑防止熒光淬滅嗎？

A: 活細胞的染色，不需要加抗熒光淬滅封片液。

Q: 固定后的熒光還會淬滅么？或者說可以維持多長時間？

A: ER-Tracker Red 按照后附的使用說明染色后，用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留， 熒光均會有淬滅的現(xiàn)象的。具體的熒光維持時間這邊沒有具體數(shù)據(jù)可參考。

Q: 請問 mito-tracker green 和 ER-traker red 是同時染還是分開依次染，染完后熒光可持續(xù)多久（也就是在多長時間內(nèi)還可以檢測）？

A: 建議分開依次染色，熒光均存在淬滅的現(xiàn)象，染色完建議盡快在1-2h內(nèi)完成檢測。

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